無細胞表達系統(Cell-Free Protein Expression System),也被稱為體外表達系統,是一種在細胞外部進行蛋白質合成的技術,不依賴于真實的細胞環境。該系統通過利用細胞提取物、細胞質萃取物或合成的細胞自由體系中的細胞合成機器、蛋白折疊因子及其他相關酶系,結合外源DNA或mRNA模板,以及添加必要的底物(如氨基酸、能量底物、輔因子、鹽和核苷酸)來實現蛋白質的體外合成。
無細胞表達系統的主要作用:
1、高效快速的蛋白合成
速度快:相比傳統的基于細胞的表達系統,無細胞表達系統可以在幾小時內完成蛋白質合成,而傳統方法通常需要幾天甚至更長時間。
效率高:該系統突破了細胞生長和代謝的限制,能夠快速且大量地產生目標蛋白,顯著提升了生產效率。
2、毒性蛋白的表達
耐受性強:由于不依賴于活細胞,無細胞表達系統對毒性蛋白的耐受力高,使其能夠合成那些在體內會對宿主細胞造成毒害的蛋白。
應用廣泛:這一特點使得無細胞系統在合成具有特殊功能的毒性蛋白時具有獨優勢,如抗癌蛋白藥物的研究和開發。
3、高通量藥物篩選
高通量表達:無細胞表達系統適用于高通量蛋白表達,可快速生成大量的蛋白樣品用于藥物篩選。
自動化兼容:該系統易于自動化,有助于實現大規模的藥物篩選和蛋白表達項目的自動化管理。
4、復雜蛋白的正確折疊
調控簡便:無細胞系統可通過調節反應條件促進蛋白質的正確折疊,從而獲得具有生物活性的蛋白質。
靈活性高:研究者們可以根據需要調整反應體系,以優化特定蛋白質的合成和折疊效率。
5、個體化定制腫瘤疫苗
個性化醫療:無細胞表達系統可用于快速生產針對特定患者的個體化腫瘤疫苗,大大縮短疫苗的研發和生產時間。
精確治療:通過快速合成特定的腫瘤相關抗原蛋白,為癌癥患者提供定制化的治療選項,提高了治療的針對性和效果。
6、降低實驗要求和成本
操作簡便:無細胞蛋白合成過程簡單,對實驗室環境和操作人員的要求較低,簡化了實驗操作。
成本效益:經過優化,無細胞系統的生產成本大幅降低,使得大規模生產變得經濟可行。